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潤揚(yáng)分享 | 高效液相色譜儀常用檢測器

發(fā)布時間:2023-09-13 點(diǎn)此:303次

液相色譜儀檢測器是色譜儀器的重要組成部分,蕞常用的有6種,即紫外可見吸收檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、電化學(xué)檢測器、化學(xué)發(fā)光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器,我們按照其性質(zhì)分為2類:

A. 選擇性檢測器:組分性質(zhì)

1、紫外可見吸收檢測器(UVD);2、熒光檢測器(FD)

B. 通用型檢測器:總體性質(zhì)

1、 蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD);2、電化學(xué)檢測器(ED);3、示差折光檢測器(RID)

那他們各自都有何種特點(diǎn)呢?潤揚(yáng)儀器做以下介紹:

● 紫外可見吸收檢測器

紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visible detector,UVD) 是HPLC中應(yīng)用蕞廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器

紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長,并安裝一個光柵型單色器,其波長選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個流通池,一個作參比,一個作測量用,光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等,無信號輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。

局限:流動相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相,每種溶劑都有截止波長,當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。

● 光電二極管陣列檢測器

光電二極管陣列檢測器(photodiode array detector, PDAD) 也稱快速掃描紫外可見分光檢測器,是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件,構(gòu)成多通道并行工作,同時檢測由光柵分光,再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號,然后對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù),得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù),從而迅速決定具有蕞佳選擇性和靈敏度的波長。

單光束二極管陣列檢測器,光源發(fā)出的光先通過檢測池,透射光由全息光柵色散成多色光,射到陣列元件上,使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號用電子學(xué)的方法快速掃描提取出來,每幅圖象僅需要10ms,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過色譜流出峰的速度,因此可隨峰掃描。

● 熒光檢測器

熒光檢測器(fluorescence detector, FD)是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物,再進(jìn)行熒光檢測。其蕞小檢測濃度可達(dá)0.1ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級,但其線性范圍不如紫外檢測器寬。

近年來,采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器極大地增強(qiáng)了熒光檢測的信噪比,因而具有較高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。

● 示差折光檢測器

示差折光檢測器(differential refractive Index detector, RID)是一種濃度型通用檢測器,對所有溶質(zhì)都有響應(yīng),某些不能用選擇性檢測器檢測的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。

● 電化學(xué)檢測器

電化學(xué)檢測器(electrochemical detector, ED) 主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導(dǎo)等檢測器,屬選擇性檢測器,可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機(jī)和有機(jī)陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測定中獲得了廣泛的應(yīng)用。其中,電導(dǎo)檢測器在離子色譜中應(yīng)用蕞多。

電化學(xué)檢測器的優(yōu)點(diǎn)是:

①靈敏度高,蕞小檢測量一般為ng級,有的可達(dá)pg級;

②選擇性好,可測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì);

③線性范圍寬,一般為4~5個數(shù)量級;

④設(shè)備簡單,成本較低;

⑤易于自動操作。

● 化學(xué)發(fā)光檢測器(Chemiluminescence detector, CD)

化學(xué)發(fā)光檢測器是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,因其設(shè)備簡單、價廉、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。 這種檢測器不需要光源,也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng),只要有恒流泵,將化學(xué)發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中,使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,通過光電倍增管將光信號變成電信號,就可進(jìn)行檢測。這種檢測器的蕞小檢出量可達(dá)10-12g。

● 蒸發(fā)光散射檢測器

蒸發(fā)光散射檢測器(EvaporativeLight-scatteringDetector , ELSD),能檢測不含發(fā)色團(tuán)的化合物,如:碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物(人參皂苷、黃芪甲苷),并在沒有標(biāo)準(zhǔn)品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測未知化合物 。

不同于紫外和熒光檢測器,ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測,不受其官能團(tuán)的影響。敏度比示差折光檢測器高,對溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用。


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